%0 Journal Article %A 孟丽虹 %A 刘秀霞 %A 杨艳坤 %A 白仲虎 %T 基于全基因组重测序策略对谷氨酸棒杆菌外源蛋白高产菌株相关基因的挖掘及初步验证 %D 2021 %R 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.027411 %J 食品与发酵工业 %P 1-6 %V 47 %N 24 %X 谷氨酸棒杆菌是食品安全级菌株,可作为生产高价值产物的优良底盘细胞用于工业生产。它具有良好的分泌系统,是表达重组蛋白的潜在宿主,有极大的研究价值。为优化底盘细胞提高其蛋白表达能力,挖掘并验证谷氨酸棒杆菌中与外源蛋白高表达相关的基因。在谷氨酸棒杆菌重测序的基础上,应用生物信息学对单核苷酸多态性(single-nucleotide polymorphisms, SNP)基因进行挖掘,分析基因保守结构域。通过构建SNP基因过表达和敲除重组菌株,评估其生长情况以及增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein, EGFP)和人重组特立帕肽(recombinant human teriparatide, rtPTH)的外源蛋白表达能力。分析并整理了高产量外源蛋白菌株的重测序数据,共有33个SNP突变位点,主要涉及5个基因。其中SNP重组菌株over-2370和ko-973-974的荧光值最高,并且发酵生产rtPTH,均比野生型(wild type,WT)提高了近1倍。该研究成功挖掘出与蛋白表达相关的基因GL002370和GL000974,这些发现将有助于获得优化的底盘细胞,并为深入研究增加蛋白产量的靶基因提供指导。 %U http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.027411