%0 Journal Article
%A 袁风娇
%A 李雪晴
%A 李剑芳
%A 等
%T Lactobacillus plantarum苯丙酮酸还原酶的异源表达及其在苯乳酸制备中的应用
%D 2017
%R 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015007
%J 食品与发酵工业
%P 16-21
%V 43
%N 11
%X 构建产苯丙酮酸还原酶的基因工程菌E.
coli/ppr,优化其目的蛋白表达条件,并利用全细胞催化制备光学纯的D-苯乳酸。以Lactobacillus plantarum的基因组DNA为模板,经PCR扩增出一种编码苯丙酮酸还原酶的基因 (lpppr),并将其在大肠杆菌BL21中进行表达。以苯丙酮酸为底物,通过单因素和正交试验优化诱导表达条件,然后对E.
coli/ppr全细胞制备苯乳酸的工艺进行研究。结果表明:E. coli/ppr在IPTG终浓度为0.5
mmol/L,20℃诱导8
h时具有最高的苯丙酮酸还原酶活性。由其催化制备苯乳酸的最佳条件为:反应温度40℃,反应初始pH
6.5,葡萄糖浓度20 mmol/L。在上述条件下增加苯丙酮酸的浓度至25 mmol/L,5
h后苯乳酸的最终产率达到98.4%,产物D-苯乳酸光学纯度ee>99.9%。
%U http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015007