%0 Journal Article %A 袁风娇 %A 李雪晴 %A 李剑芳 %A 等 %T Lactobacillus plantarum苯丙酮酸还原酶的异源表达及其在苯乳酸制备中的应用 %D 2017 %R 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015007 %J 食品与发酵工业 %P 16-21 %V 43 %N 11 %X 构建产苯丙酮酸还原酶的基因工程菌E. coli/ppr,优化其目的蛋白表达条件,并利用全细胞催化制备光学纯的D-苯乳酸。以Lactobacillus plantarum的基因组DNA为模板,经PCR扩增出一种编码苯丙酮酸还原酶的基因 (lpppr),并将其在大肠杆菌BL21中进行表达。以苯丙酮酸为底物,通过单因素和正交试验优化诱导表达条件,然后对E. coli/ppr全细胞制备苯乳酸的工艺进行研究。结果表明:E. coli/ppr在IPTG终浓度为0.5 mmol/L,20℃诱导8 h时具有最高的苯丙酮酸还原酶活性。由其催化制备苯乳酸的最佳条件为:反应温度40℃,反应初始pH 6.5,葡萄糖浓度20 mmol/L。在上述条件下增加苯丙酮酸的浓度至25 mmol/L,5 h后苯乳酸的最终产率达到98.4%,产物D-苯乳酸光学纯度ee>99.9%。
%U http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015007