稀酸微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定红糖中六种营养元素

杨伟,李蓉*,范晓旭,杨春花,周美丽

(大理州食品检验检测院,云南 大理,671000)

摘 要 该研究建立了测定红糖中Mn、Fe、Co、Cu、Zn和Sr营养元素的稀酸微波消解-电感耦合等离子体质谱方法。通过单因素实验考察了硝酸浓度、过氧化氢体积和消解时间对红糖样品中元素回收率的影响,得到最佳消解条件。结果表明,稀酸微波消解的最佳工艺条件为:硝酸浓度1.0 mol/L,过氧化氢体积1 mL,消解时间27 min。该方法各元素的标准曲线线性关系良好,相关系数大于0.999 5,方法检出限和定量限分别为0.001~0.05 mg/kg 和0.004~0.2 mg/kg,相对标准偏差小于5%,加标回收率为87.5%~110.2%。t检验表明,该方法与GB 5009.268—2016中微波消解-ICP-MS法测定结果无显著性差异(P>0.05)。该方法操作简单、灵敏度高、结果准确,可为红糖中营养元素的测定提供参考。

关键词 稀酸;微波消解法;红糖;营养元素;电感耦合等离子体质谱法

红糖又称“非分蜜糖”,是甘蔗的茎汁经浓缩而成的带蜜糖。与精制糖相比,红糖中含有较高含量的必需氨基酸、维生素和矿物营养元素,是一种高营养食品[1-3]。红糖还具有补血活血、抗龋齿、预防糖尿病和高血压等保健功效,这与红糖中参与代谢的微量元素相关[4]。由于受甘蔗品种、加工工艺、贮存方式等因素的影响,红糖中无机元素的含量存在一定差异。因此,建立准确快速的方法测定红糖中无机元素含量,对控制红糖的品质以及保障食用者的健康具有重要意义。

目前,食品中无机元素的测定方法主要有:原子荧光光谱法、原子吸收光谱法、电感耦合等离子体发射光谱法和电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry, ICP-MS)法[5-8],其中,ICP-MS法具有灵敏度高、检出限低、可进行多元素同时测定等优点,已列入GB 5009.268—2016《食品安全国家标准 食品中多元素的测定》的第一法[9],尤其适合食品中微量和痕量元素的分析。采用光谱分析法或ICP-MS法测定食品中无机元素前,一般需要进行前处理,使固体样品转化为溶液引入仪器检测。目前,样品前处理所用方法以微波消解居多,GB 5009.268—2016和参考文献报道,微波消解使用浓硝酸或浓硝酸+过氧化氢体系对样品进行前处理[9-12],样品消解彻底,空白值低,但浓酸的使用增加了试剂用量、消解液酸残留和废弃酸的排放。稀酸微波消解法主要采用稀硝酸+过氧化氢体系对样品进行消解[13-15],与浓酸微波消解法相比,不仅样品消解彻底、空白值低,而且有效减少了试剂用量、消解液酸残留和废弃酸的排放。目前,使用稀酸微波消解处理红糖样品,ICP-MS检测其无机元素含量的方法鲜见报道。

本文拟采用稀硝酸和过氧化氢为消解体系对红糖样品进行前处理,通过优化硝酸浓度、过氧化氢体积和消解时间,并结合ICP-MS对其中Mn、Fe、Co、Cu、Zn和Sr 6种营养元素进行分析,以期建立一种红糖中营养元素简单、准确且环保的测试方法。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

多元素标准储备液(含Mn、Fe、Co、Cu、Zn和Sr,质量浓度均为100 μg/mL)、内标混合溶液(含Sc、Ge和Rh,质量浓度均为100 μg/mL),国家有色金属及电子材料分析测试中心,使用前用0.288 mol/L硝酸稀释至浓度均为1 μg/mL的内标使用液;调谐液(Ce、Co、Li、Mg、Tl和Y,质量浓度均为1 μg/L),美国安捷伦公司;30%过氧化氢(电子级),苏州晶瑞化学股份有限公司;65%浓硝酸(优级纯),德国Merck公司;试验用水均为超纯水(电阻率>18 MΩ·cm)。

1.2 仪器与设备

Agilent 7900型电感耦合等离子体质谱仪,美国安捷伦公司;ETHOS UP型微波消解仪,意大利Milestone公司;VB24 UP型智能样品处理器,北京Lab Tech公司;PURELAB Chorus1 Complete型超纯水仪,英国ELGA LabWater公司;ML204T/02型电子天平,瑞士Mettler Toledo公司。经优化的ICP-MS工作参数列于表1。

表1 ICP-MS工作参数
Table 1 The working parameters of ICP-MS

仪器参数设定值仪器参数设定值射频功率 1 550 W雾化室温度2 ℃雾化气流量 1.00 L/min氦气流量5.0 mL/min辅助气流量 0.90 L/min调谐模式氦气模式蠕动泵 0.10 r/min氧化物比率<2%等离子气流量15.0 L/min双电荷比率<3%

1.3 试验方法

1.3.1 标准溶液的配制

分别精密量取多元素标准储备液1.0和10.0 mL至100 mL容量瓶中,用0.288 mol/L硝酸定容,配制成Mn、Fe、Co、Cu、Zn、Sr质量浓度为1.0和10.0 μg/mL的标准中间液。再分别精密量取1.0和10.0 μg/mL标准中间液0.00、0.10、0.50、1.00、3.00、5.00 mL至100 mL容量瓶中,用0.288 mol/L硝酸稀分别释成Co、Cu、Sr质量浓度为0、1.0、5.0、10.0、30.0、50.0 μg/L和Mn、Fe、Zn质量浓度为0、10.0、50.0、100、300、500 μg/L的系列标准溶液。

1.3.2 稀酸微波消解法

称取0.25 g(精确至0.000 1 g)样品于80 mL聚四氟乙烯消解罐中,加入7 mL浓度分别为1.0、2.1、4.2和6.3 mol/L的硝酸溶液和不同体积的过氧化氢(0、0.5、1和2 mL),旋紧罐盖,放入消解仪,按照升温程序:5 min从室温升至120 ℃,保持2 min,然后10 min从120 ℃升至190 ℃,在190 ℃分别保持不同的反应时间(10、20和30 min)。消解完毕,待消解罐冷却,将消解液转移至50 mL容量瓶中,用少量超纯水冲洗消解罐3~4次,合并洗涤液于容量瓶中,加水定容至刻度。用相同的方法做空白试验。

1.3.3 浓酸微波消解法

参考GB 5009.268—2016中电感耦合等离子体质谱法,称取0.25 g(精确至0.000 1 g)红糖样品,使用微波消解法处理,ICP-MS测定各元素含量。

2 结果与分析

2.1 消解条件的选择

随机选取颜色较深的红糖(HT1)为试验样品。称取样品0.25 g(精确至0.000 1 g),设置微波消解最高温度为190 ℃[9,16-17],考察硝酸浓度、过氧化氢体积和消解时间对元素回收率的影响。回收率为不同消解条件下,测定的样品质量浓度与浓酸微波消解法测定的质量浓度的比值(用百分比表示)[17-18]

2.1.1 硝酸浓度

采用1.0、2.1、4.2和6.3 mol/L硝酸溶液消解样品,考察硝酸浓度对各元素回收率的影响。图1显示,随着硝酸浓度的增加,各元素回收率无明显变化,总体回收率为93%~105%,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)≤3%。综合考虑消解效果和试剂用量,选择硝酸的浓度为1 mol/L。

图1 硝酸浓度对元素回收率的影响(n=3)
Fig.1 Effect of HNO3 concentration on the recoveries of elements(n=3)

2.1.2 过氧化氢体积

采用0、0.5、1和2 mL过氧化氢消解样品,考察加入不同体积的过氧化氢对各元素回收率的影响。当加入过氧化氢0和0.5 mL时,消解液外观分别呈黄色和淡黄色,有较多悬浮物;当加入1 mL过氧化氢时,消解液呈无色透明,悬浮物基本消失,样品消解效果较好;当过氧化氢加入量增加至2 mL时,消解液的外观无明显变化。由图2可知,过氧化氢加入1 mL时,6种元素的回收率(95%~109%)最好,RSD≤5%。综上,选择过氧化氢的加入体积为1 mL。

图2 过氧化氢加入量对元素回收率的影响(n=3)
Fig.2 Effect of H2O2 volume on the recoveries of elements(n=3)

2.1.3 消解时间

分别设置消解时间为27、37和47 min,考察不同消解时间对各元素回收率的影响。由图3可知,各元素回收率受消解时间的影响较小,总体回收率为94%~105%。其中消解时间为27 min时,各元素的回收率为95%~103%,RSD≤3%,回收率和稳定性最佳。因此,选择消解时间为27 min。

图3 消解时间对元素回收率的影响(n=3)
Fig.3 Effect of digestion time on the recoveries of elements(n=3)

2.2 ICP-MS干扰的排除

红糖中钾、钙、镁的含量较高[3],在测试过程中分析信号存在明显漂移现象,元素Mn、Fe、Co、Cu、Zn、Sr受到一定的基体干扰和质谱干扰。实验在配制标准溶液时,使标准溶液中硝酸的浓度和空白、样品溶液匹配,且对不同元素选用质量数接近、化学性质相似的内标元素:元素Mn、Fe选择45Sc为内标元素,Co、Cu、Zn选择72Ge为内标元素,Sr选择103Rh为内标元素,并通过蠕动泵和T型混合三通在线引入1 μg/mL的内标溶液较好地消除基体干扰,改善方法的精密度。通过优化仪器工作参数(表1),对不同元素选用丰度大、灵敏度高、干扰小的同位素(55Mn、56Fe、59Co、63Cu、66Zn和88Sr),采用八极杆氦气碰撞模式和四极杆质量分析器消除质谱干扰。

2.3 线性和检出限

取1.3.1节系列标准溶液进行检测,获得各元素标准曲线。取样品空白溶液,重复测定11次,计算各元素的检出限和定量限(表2)。所有工作曲线线性关系良好,相关系数大于0.999 5,各元素的检出限和定量限分别为0.001~0.05 mg/kg和0.004~0.2 mg/kg,满足检测要求。

表2 标准曲线方程、相关系数、检出限和定量限
Table 2 Regression equations, correlation coefficients, detection limits and quantification limits

元素标准曲线方程相关系数检出限/(mg·kg-1)定量限/(mg·kg-1)Mny=0.024 6x+0.003 30.999 80.0080.03Fey=0.053 4x+0.137 50.999 80.10.3Coy=0.164 9x+0.003 80.999 80.0010.004Cuy=0.135 8x+0.022 40.999 90.0040.01Zny=0.014 1x+0.021 41.000 00.050.2Sry=7.630 1×10-4x+3.769 9×10-50.999 60.010.03

2.4 精密度和加标回收率

称取HT1样品6份,按优化后的条件测定,测定结果的相对标准偏差即为方法精密度,所测各元素的RSD值为1.52%~3.67%,说明方法精密度良好。另称取HT1样品24份,添加3个不同浓度的标准溶液,每个浓度做3个平行试验[19],6种元素的平均回收率为87.5%~110.2%,RSD值在0.24%~4.96%,表明方法的准确度较高,其结果见表3。

表3 方法精密度和加标回收率
Table 3 Precisions and recoveries of the method

元素本底值/(μg·L-1)RSD/%(n=6)加标量/(μg·L-1)加标后测定值/(μg·L-1)平均回收率/%RSD/%(n=3)50.0160.348~161.265100.00.94Mn110.8403.62100201.256~210.68995.24.96200294.903~308.31395.73.5450.0216.770~221.23598.34.78Fe169.4201.52100258.853~265.91593.63.96300440.172~462.25094.43.992.02.590~2.62393.80.96Co0.7263.675.05.279~5.30191.20.2710.09.789~9.83090.90.245.08.833~9.02087.52.19Cu4.5403.0510.013.143~13.64088.92.9020.022.399~22.66589.80.8410.032.004~32.45195.02.63Zn22.7972.3420.041.175~42.86797.44.8750.070.419~72.15896.81.835.013.995~14.317107.63.01Sr8.7872.3910.019.503~20.121109.92.8720.030.646~31.110110.21.11

2.5 对比分析

采用稀酸微波消解法(A)和浓酸微波消解法(B),分别对3种不同红糖样品进行前处理后测定,测定结果见表4。基于t检验(取置信水平α=0.05),2种消解方法测定结果之间无显著性差异(P>0.05),说明稀酸微波消解法具有一定的可靠性。

表4 不同测定方法的实验结果(n=3) 单位:mg/kg
Table 4 Experiment results of different testing methods(n=3)

样品方法元素MnFeCoCuZnSrHT1A22.2±0.733.9±0.90.152±0.0090.940±0.0194.65±0.141.71±0.06B22.0±0.334.7±0.20.145±0.0010.916±0.0214.38±0.021.76±0.05HT2A16.0±0.626.3±0.70.159±0.0031.20±0.054.32±0.181.75±0.08B16.3±0.627.1±0.70.160±0.0051.21±0.034.32±0.021.79±0.04HT3A10.8±0.133.0±0.50.104±0.0021.34±0.043.85±0.021.60±0.07B11.2±0.334.3±1.70.101±0.0041.28±0.023.80±0.041.59±0.04

注:数据为“平均值±标准偏差”

3 结论

本研究建立了稀酸微波消解-ICP-MS法测定红糖中Mn、Fe、Co、Cu、Zn和Sr 6种营养元素的方法。通过优化硝酸浓度、过氧化氢体积和消解时间获得元素较好的消解效果。采取样品重复性测试和加标回收试验,分别验证方法的精密度和准确性,通过与国标法对比分析,验证了方法的可靠性。该法操作简单、灵敏度高、结果准确且适用于红糖中6种营养元素的检测。

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Microwave-assisted digestion using diluted acid for six nutrient elements determination in brown sugar by inductively coupled plasma mass spectrometry

YANG Wei,LI Rong*,FAN Xiaoxu,YANG Chunhua,ZHOU Meili

(Dali Institute for Food Control, Dali 671000, China)

ABSTRACT Microwave-assisted digestion using diluted acid was developed for nutrient elements (Mn, Fe, Co, Cu, Zn and Sr) determination in brown sugar samples by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). The effects of different digestion conditions including HNO3 concentration, the volume of H2O2 and digestion time on the recoveries of elements were investigated by single factor experiment, and the optimum digestion conditions were obtained. The results showed that the optimum digestion conditions of microwave-assisted digestion using diluted acid were as follows: concentration of 1 mol/L HNO3, 1.0 mL of H2O2 and digestion for 27 min. The standard curve of each element was exhibited a good linear correlation with a coefficient higher than 0.999 5. The limits of detection (LODs) of 6 elements were 0.001-0.05 mg/kg, and the limits of quantification (LOQs) were 0.004-0.2 mg/kg. Moreover, the relative standard deviation (RSD) was less than 5%. Suitable recoveries (range from 87.5% to 110.2%) were obtained in three evaluations for all analytes. After the comparation with those obtained by the national standard method of China, and no statistical differences were observed (student′s t-test, confidence level of 95%, P>0.05). The proposed method is simple, high sensitivity and accurate, which is suitable for the determination of the Mn, Fe, Co, Cu, Zn and Sr in brown sugar samples.

Key words diluted acid; microwave-assisted digestion; brown sugar; nutrient element; inductively coupled plasma mass spectrometry

DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.027437

引用格式:杨伟,李蓉,范晓旭,等.稀酸微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定红糖中六种营养元素[J].食品与发酵工业,2021,47(24):261-264;270.YANG Wei,LI Rong,FAN Xiaoxu, et al.Microwave-assisted digestion using diluted acid for six nutrient elements determination in brown sugar by inductively coupled plasma mass spectrometry[J].Food and Fermentation Industries,2021,47(24):261-264;270.

第一作者:硕士,工程师(李蓉工程师为通讯作者,E-mail:lirong13990@126.com)

收稿日期:2021-03-19,改回日期:2021-04-06