空心面是具有长久食用历史的中国传统挂面,食用品质好、独具风味、易于消化,备受消费者喜爱[1]。江苏的泅洪空心挂面、绥阳空心面、陕西的岐山挂面、四川的中江挂面等,都具有鲜明的地方特色[2]。传统空心面食盐含量较高,可达10.0~20.0 g/kg,过多食用可能会增加高血压和心血管疾病等健康风险[3]。同时传统空心面制作工艺复杂,自然发酵时间长,产业化程度低,导致市场拓展受限[4]。
酵母是重要的食用微生物,在馒头、面包等发酵面制品中具有不可取代的作用[5-6]。通过定向的选育和培养,可从酵母中筛选出具有不同性能的菌种,应用到相应的食品上会起到良好的作用效果[7]。
党辉等[8]从传统的民间馒头老酵子中分离纯化得到3株酵母菌,确定其中生长力和发酵力较好的2株为酿酒酵母。玛依古丽·库尔班等[9]从新疆馕面团中筛选确定出发酵活力最好的酿酒酵母,用其制作的馕饼感官评价高。筛选空心面专用酵母菌,使生产工艺简化、安全可控是空心面工业化生产的必要前提[10-11]。张蕴华等[12]为优化空心挂面工艺,研究了不同产地的4种酵母对空心挂面品质的影响,确定C酵母添加量为1.6%时所制挂面的综合品质最佳。目前,对发酵剂发酵空心面品质分析的研究较少,筛选空心面专用酵母的相关研究未见报道。本研究利用筛选得到的酿酒酵母菌与市售酵母菌分别发酵面条,并对面条的粉质特性、流变特性、发酵特性、质构特性、蒸煮特性和微观结构进行测定,以期为提高空心面品质提供理论基础,对工业化生产提供支持。
酿酒酵母菌A,本实验室筛选自老面团,具有良好发酵特性和产气能力,经鉴定为Saccharomyces cerevisiae,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,编号为GDMCC 61665;酿酒酵母B、C、D,分别为3种国内外不同品牌的市售酵母,均为低糖型即发干酵母。
高筋小麦粉,河北金沙河面业集团有限责任公司;食盐,四川省盐业总公司;其余试剂均为分析纯,成都市科龙化学品有限公司。
HZF-150电子粉质仪,杭州绿博仪器有限公司;MCR302流变仪,德国Anton Paar公司;F3流变发酵仪,法国肖邦公司;Prox型扫描电子显微镜,荷兰Phenom公司;TA-XT型质构仪,上海腾拔仪器科技有限公司;CP114电子天平,奥豪斯仪器;POX-250-C恒温恒湿培养箱,上海琅玕实验设备有限公司。
1.3.1 酵母发酵剂的制备
将不同酵母菌接种至酵母浸出粉胨葡萄糖(yeast extract peptone dextrose, YPD)培养基,活化传代3次后,将最后1代菌液用磷酸盐缓冲液调整至活菌数为1×109CFU/mL,准备接种发酵。
1.3.2 空心面的制备
称取1 kg面粉,分别加入质量分数为0.5%的NaCl、0.8%酵母发酵剂和35%蒸馏水,混合成面絮,封保鲜膜,置于37 ℃、相对湿度85%的恒温恒湿培养箱中,静置发酵2 h后制成1 mm厚度的面片,切成2 mm宽,1 mm厚的面条,入烘干房分梯度干燥成型。以自然发酵为空白对照。
1.3.3 产气量及面团体积的变化测定
参照韩丹丹[13]的方法,测定不同酵母在面团中的产气量和面团体积的变化趋势。
1.3.4 粉质特性测定
参照李华等[14]的方法稍作修改。将1.3.2制备好的发酵面团冻干后,研磨成粉,称取含水量为14%的混粉300 g,加入粉质仪测定粉质特性。
1.3.5 动态流变学特性测定
参考文献[15-16]的方法稍作修改。将制备好的发酵面片置于流变仪载物台,选用PP25圆形检测探头,设置间隙2 mm。先在平行板上平衡3 min,消除残存应力,在动态测量模式下进行频率扫描:温度恒定25 ℃,应力0.005%,扫描频率0.1~10 Hz。
1.3.6 流变发酵特性测定
使用流变发酵仪测定面团发酵过程的流变特性。将制备好的发酵面团按照操作规程[17]进行测定,设定条件:温度30 ℃,时间3 h,砝码2 000 g,面团质量150 g。
1.3.7 质构特性测定
参考焦捷等[18]的方法稍作修改。分别取500 g空心面样品于沸水中煮6 min,然后用滤纸吸干表面水分,待测。取3根无物理损伤、粗细均匀的空心面放于质构仪平台的固定位置上,测定其硬度、弹性等指标,每个样品测定3~5次,去除最大和最小值后取平均值。参数设置:P/50探头,测试模式Comprehension,测前速度1.00 mm/s,测中速度1.00 mm/s,测后速度1.00 mm/s,压缩比75%,间隔时间5 s,触发力5 g。
1.3.8 蒸煮特性测定
参考徐一涵等[19]的方法测定空心面的最佳蒸煮时间、断条率、蒸煮损失率和浊度。
1.3.9 微观结构观察
采用扫描电镜对不同酵母发酵的空心挂面表面形态进行观察。参考文献[20-21]的方法,并作适当修改。整段状用剪刀将挂面剪成1 cm左右的小段,粉状采用粉碎机粉碎,将样品均置于55 ℃烘箱中干燥24 h,使其水分含量<10%。干燥后的粉状样品,置于含有导电双面胶的金属圆盘上,真空条件下镀金处理,再将圆盘放入扫描电子显微镜,放大1 000倍观察。
采用SPSS 25.0和Origin 2020软件进行统计学分析和作图,每组实验重复3次。
通过测量产气量和面团增加体积,评价酵母发酵力、检验酵母的产气能力和持气能力[13]。由图1和图2可知,添加不同酵母发酵的面团产气量和面团体积差异显著(P<0.05)。由图1可知,随着发酵时间的增加,面团产气量不断增加,前2 h产气量增加最为明显,之后变缓至趋于平缓。酵母B、C、D发酵组,产气量趋势和A组一致,空白组产气量增加缓慢且最低;酵母A组产气量最高,达(1 691.6±25.33) mL。
图1 不同酵母发酵空心面团的产气量
Fig.1 Gas production of hollow noodle dough fermented by different yeasts
图2可以看出,随着发酵时间的增加,面团体积在不断增加,然后下降一定体积至稳定。酵母C、D组趋势一致,酵母A组体积增加最多,且面团体积稳定后下降的总体积最少,为16.6 mL;空白组在3 h后高度开始下降,下降体积最多,为56.5 mL。总的来说,酵母A的发酵能力最强,其次为D组,空白组最弱。
图2 不同酵母发酵空心面团的体积
Fig.2 Volume of hollow noodle dough fermented by different yeast
通过测量面团的粉质特性,评价其质量和加工特性。由表1可知,除酵母B、C、D组之间发酵面团粉质特性差异不显著外,酵母A、酵母B、C、D和空白组之间变化差异显著(P<0.05)。相对于空白组,4组酵母组的弱化度和吸水率显著降低,且粉质质量指数均高于80,说明发酵显著改变了面团的粉质特性。这可能是酵母菌在面团发酵过程中使面筋蛋白充分延伸,面团充分膨胀,改善了面团的结构特性[22]。酵母A组面团的吸水率和弱化度最低,说明A组发酵的面团筋力最强,面团搅拌后仍然能保持较高的成型度,不易塌陷。A组面团的形成时间、稳定时间最长,粉质质量指数达到(91±0.28),说明面团的耐揉度和稳定性最好。总的来说,利用酵母菌发酵面团可以有效提高面粉的粉质特性,使面团的粉质质量指数明显升高,这与张煌等[23]的研究结果相似。
表1 不同酵母发酵空心面团的粉质特性
Table 1 Powder properties of hollow noodle dough fermented by different yeasts
酵母种类吸水率/%形成时间/min稳定时间/min弱化度/FU粉质质量指数A57.3±0.24a5.1±0.21c7.6±0.09c51.6±0.45a91±0.28cB69.7±0.21b3.5±0.18b5.7±0.06b59.6±0.53b84±0.24bC67.5±0.16b3.6±0.19b5.9±0.11b57.7±0.62b86±0.32bD65.8±0.17b3.9±0.23b6.2±0.08b55.4±0.39b87±0.26b空白75.2±0.19c2.5±0.16a4.1±0.07a70.2±0.48c49±0.30a
注:不同小写字母表示同列差异显著(P<0.05)(下同)
面团的流变学特性决定着产品的加工品质和最终质量。以频率10 Hz时空心面条面团的黏弹性作代表,由表2可知,不同菌种发酵面团弹性模量(G′)和黏性模量(G″)排序由高到低依次为酵母A组、D组、C组、B组、空白组,且酵母B、C、D组无显著差异(P>0.05)。损耗角正切值(tanδ)排序由高到低是空白组、酵母B组、C组、D组、A组,且酵母B、C、D组无显著差异(P>0.05)。相对于空白组,4组发酵组的弹性模量和黏性模量显著增加,说明发酵改变了面团的面筋结构,使面团中大分子聚合物含量增多,淀粉颗粒与蛋白质紧密镶嵌[24]。A组的损耗角正切值最低,说明其面团聚合度最高,黏弹性最强,这与上面A组粉质质量指数最高相符。总的来说,利用酵母发酵面团会影响面筋蛋白网络结构,面团产品具有更高聚合固体样品行为,这与拱姗姗等[25]的研究结果相似。
表2 不同酵母发酵空心面团的动态流变学特性
Table 2 Dynamic rheological properties of hollow noodle dough fermented by different yeasts
酵母种类弹性模量G′/Pa黏性模量G″/Pa损耗角正切值tanδA240 333.33±8 876.43c100 666.67±5 535.78c0.37±0.01aB194 200.00±5 424.79b85 433.33±4 347.65b0.39±0.02bC199 500.00±4 877.24b86 333.33±2 876.73b0.39±0.02bD207 666.67±5 243.45b89 900.00±3 734.20b0.39±0.01b空白168 766.67±7 735.28a69 800.00±4 457.54a0.41±0.02c
面团的流变发酵特性测量的是面团发酵过程体积变化、气体生成和保持能力。由表3可知,不同酵母发酵面团的发酵能力存在差别。面团膨胀的最大高度(Hm)、气体释放曲线最大高度(H′m)、面团开始泄露CO2的时间(Tx)、产气总量(V)和面团持气性(R)由高到低为:酵母A组、D组、C组、B组、空白组,除酵母B、C组无显著差异外,其他组差异显著(P<0.05)。A组的产气总量最高,达(1 687.53±53.75) mL,说明酵母A发酵能力高,且由面团持气保留系数R可知,酵母A持气力最强。持气性和产气性都直接影响产品的质量和生产效益,持气性越强,产品体积也越大。达到曲线最大高度的发酵时间(T1)由高到低为空白组、酵母B组、C组、D组、A组,酵母B、C组无显著差异(P>0.05),4组酵母中B和C组发酵面团膨胀至最高的发酵时间最长。总的来说,空白组产气能力弱,持气性差;B、C、D组明显优于空白组,但产气和持气能力低于酵母A组。这可能是酵母A具有较高的酶活性,产生CO2气体的速率较高,对面筋蛋白和面团结构的延伸作用能力更强[26]。
表3 不同酵母发酵空心面团流变发酵特性结果
Table 3 Rheological and fermentation characteristics of hollow noodle dough fermented by different yeasts
酵母种类Hm/mmH′m/mmT1/minTX/minV/mLR/%A44.56±0.35d97.48±0.67d116.75±1.45a98.75±0.45d1 687.53±53.75d87.68±0.20dB37.37±0.37b88.43±0.85b142.50±0.99c79.50±0.60b1 598.64±25.86b78.34±0.16bC38.22±0.41b90.54±0.54b137.25±1.05c82.00±0.35b1 609.45±38.45b80.15±0.22bD39.86±0.28c91.79±0.77c130.50±0.87b85.50±0.55c1 632.57±28.33c81.96±0.25c空白28.43±0.25a58.45±0.59a193.25±1.26d48.25±0.65a856.48±36.47a58.43±0.09a
利用质构仪测定不同酵母发酵对空心面条质构特性的影响,结果如表4所示。除4种酵母在黏聚性上没有显著区别,酵母B、C、D组间差异不显著外,其余组发酵的空心面在硬度、弹性、咀嚼性和回复性4种质构指标变化上差异显著(P<0.05)。除硬度低于空白组外,酵母A、B、C、D组在4种质构指标上均高于空白组,说明酵母菌发酵显著提高了空心面的质构品质,与邢文君[27]的研究结果一致。酵母A组的弹性、咀嚼性和回复性显著高于B、C、D 3个酵母组。这可能是通过酵母发酵后,面筋蛋白中的二硫键增加,加上产生的CO2会使面团的面筋网络蛋白结构延伸,面团持气性好,面团的面筋蛋白网络结构更紧密,所产出的空心面质构也更优质[28]。综上,利用酵母发酵制得的空心面品质更佳,这与程晓燕[29]得到的筛选面团中的专用菌株显著提高产品质构品质的结论一致。
表4 不同酵母发酵空心面的质构特性
Table 4 Texture characteristics of hollow noodles fermented by different yeast
酵母种类硬度/g弹性黏聚性咀嚼性/g回复性A5 683.20±253.07a0.95±0.05c0.76±0.01b2 632.41±124.64c0.62±0.04cB5 932.41±143.75b0.88±0.03b0.70±0.02b2 356.52±96.377b0.51±0.06bC5 897.11±185.98b0.89±0.06b0.72±0.04b2 387.08±119.56b0.50±0.03bD5 826.64±267.52b0.91±0.02b0.73±0.03b2 420.97±150.27b0.48±0.03b空白7 253.43±311.35c0.79±0.07a0.62±0.02a1 913.58±240.14a0.34±0.05a
由表5可知,除酵母B、C、D组差异不显著外,其余组发酵的空心面在最佳蒸煮时间、断条率、蒸煮损失率、浊度4种蒸煮特性指标上差异显著(P<0.05)。空白组的断条率、蒸煮损失率和浊度最差,说明发酵可改善空心面的蒸煮特性。酵母A、B、C、D组发酵的空心面条断条率≤5.0%,蒸煮损失率≤10%,符合挂面行业标准LS/T 3212—2021。酵母A组发酵的空心面具有较低的蒸煮损失率和浊度,且断条率为0,最佳蒸煮时间也快于其他发酵组。这是因为发酵改善了面团结构,使得面筋蛋白网络更为紧密,面条筋道,不容易断条且不浑汤,具有较好的蒸煮品质。
表5 不同酵母发酵空心面的蒸煮特性
Table 5 Cooking characteristics of hollow noodles fermented by different yeasts
酵母种类最佳蒸煮时间/min断条率/%蒸煮损失率/%浊度A4.5±0.12b0a2.33±0.25a0.089±0.02aB5.2±0.10c5.0±0.22b2.97±0.17b0.127±0.04bC5.0±0.15c2.5±0.14b2.91±0.08b0.121±0.01bD4.8±0.10c2.5±0.18b2.86±0.12b0.115±0.02b空白3.0±0.08a15.0±0.20c8.67±0.19c0.284±0.03c
图3为5种不同空心面在扫描电镜下放大1 000倍图像。
a-酵母A;b-酵母B;c-酵母C;d-酵母D;e-空白
图3 不同酵母发酵空心面微观结构图
Fig.3 Microstructure of hollow noodles fermented by different yeast
可以看出,完整的淀粉颗粒一般为圆形或者椭圆形的,表面比较光滑,没有明显的裂缝,且分散性较好。较大颗粒的小麦粉蛋白网络结构(面筋蛋白)充分均匀包裹在淀粉表面。面条经过压延和干燥,淀粉粒游离或借助于蛋白质基质黏连在面筋蛋白网络上。整体而言,面条内部呈松散的干混凝土状,蛋白质像泥浆,淀粉颗粒像鹅卵石。
空白组的面筋网络结构比较疏松,面条均匀性较差,淀粉颗粒与面筋网络之间的空隙较多,面条质地不紧密。与之相比,A、B、C、D组面条的均匀性良好,其中A组淀粉颗粒被紧密包裹在面筋网络结构之中,质地紧密,空隙较少;A组面条样品的淀粉表面是所有空心面样品中最光滑,颗粒最完整的。不同菌种生产的发酵空心面样品淀粉表面光滑度,颗粒完整度排序:酵母A>酵母D>酵母C>酵母B>空白。总的来说,酵母发酵显著改善了面条的面筋网络结构。
本研究将筛选得到的酿酒酵母菌与市售酵母菌分别发酵面条,并对发酵力、粉质特性、流变特性、发酵特性、质构特性、蒸煮特性和微观结构进行测定。相对于未发酵,酵母发酵后的面团品质特性更好,生产的空心面品质更佳;4组发酵组中,酵母A发酵生产的空心面面团耐揉度和筋力最好,粉质质量指数达到(91±0.28);面团黏弹性最好,聚合度最高。在发酵特性上酵母A的发酵力最强,产气力和持气力最好;同时发酵的样品在质构特性和综合蒸煮品质上也是发酵组中最佳。扫描电镜结果显示,A组面条面筋网络结构紧密,因而面条面团的黏弹性好,聚合度高。因此,利用筛选的酵母菌A更适用于空心面的发酵生产,产品具有良好的生产特性和综合品质。
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