一种检测葡萄糖氧化酶活力的新方法

doi:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.022487

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摘要在葡萄糖氧化酶研发生产过程中,需要对发酵液进行酶活力检测。目前常用的方法有滴定法、电化学法和连续分光光度法,但这些方法均因其独立重复实验误差较大而缺乏实用性。因此建立一种操作简单、快速、重现性好、成本低的检测方法,是葡萄糖氧化酶研发生产中亟待解决的问题。该项研究在生产实践中,开发建立了一种新的葡萄糖氧化酶活性测定方法:碘-淀粉分光光度法。以β-D-葡萄糖为底物,利用葡萄糖氧化酶特异性催化作用,生成中间产物过氧化氢,再通过碘-淀粉分光光度法定量测定过氧化氢含量,进而计算葡萄糖氧化酶活力。结果表明:反应体系在葡萄糖氧化酶浓度为0.1~0.5 U/mL范围时,检测平行性良好,独立重复实验酶活力计算结果相对偏差小于5%,在统计学分析误差范围内。

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关键词: 葡萄糖氧化酶葡萄糖过氧化氢碘-淀粉分光光度法

Abstract: Many methods, such as titration, electrochemical and continuous spectrophotometry have been developed for measuring the activity of glucose oxidase. However, they are regarded as impractical since they all have large errors in independent repeated experiments and a simple and fast method with better reproducibility and less costs is desperately needed. In this study, an iodine-starch spectrophotometry method for measuring the activity of glucose oxidase was developed. The method used β-D-glucose as the substrate which could be turned into gluconic acid and produce hydrogen peroxide at the same time when the reaction started and an iodine-starch spectrophotometry method was used to measure the content of hydrogen peroxide produced. The results showed that the new developed method had good parallelism within the activity range of 0.1-0.5 U/mL in the measurement system. The average relative deviation was less than 5%, which was within the statistical margin of error. To sum up, this innovative method for measuring glucose oxidase activity is promising in laboratory or industry application for its accurate and stable with good reproducibility and low cost.

Key words: glucose oxidase glucose hydrogen peroxide iodine-starch spectrophotometry

收稿日期: 2019-10-09 出版日期: 2020-05-15 发布日期: 2020-02-01 期的出版日期: 2020-05-15

基金资助: 江苏省优势学科建设工程资助项目(PAPD)

作者简介: 硕士研究生(安贤惠教授为通讯作者,E-mail:anxh@hhit.edu.cn)

引用本文:

惠瑶瑶,郑斐,王倩楠,等. 一种检测葡萄糖氧化酶活力的新方法[J]. 食品与发酵工业, 2020, 46(9): 255-259.
HUI Yaoyao,ZHENG Fei,WANG Qiannan,et al. An innovative iodine-starch spectrophotometry method forquantitative detection of glucose oxidase[J]. Food and Fermentation Industries, 2020, 46(9): 255-259.

链接本文:

http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.022487 或 http://sf1970.cnif.cn/CN/Y2020/V46/I9/255

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