自来水基中性电解水(tap water-based neutral electrolyzed water,TNEW)是一种具有广阔应用前景的温和果蔬减菌剂,但其杀菌机制不清楚,且缺少对果蔬减菌效果的系统评价。鉴于此,该研究以大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)等典型果蔬腐败微生物为对象,考察了TNEW处理对2种菌杀菌效果的动态影响,结合细胞壁与细胞膜完整性、内容物外泄及形态变化等多角度深入解析其杀菌机制。结果表明,TNEW处理E.coli菌悬液12 min,处理S.aureus菌悬液6 min,处理组中存活菌数均已低于检测限(<1.0 lg CFU/mL)。TNEW处理可显著破坏E.coli和S.aureus的细胞膜完整性,导致核酸、蛋白质及碱性磷酸酶等胞内物质的持续外泄,降低胞内三磷酸腺苷水平并破坏细胞形态。在蓝莓和生菜的应用中发现,TNEW处理9 min可使二者菌落总数分别减少0.60、2.00 lg CFU/g,E.coli载量分别减少1.12、1.18 lg CFU/g,S.aureus载量分别减少1.99、1.35 lg CFU/g,且对其抗坏血酸含量无显著影响(P>0.05)。该研究为开发新型果蔬非热杀菌技术提供了理论依据和技术参数,为其他食品原料杀菌提供了新思路。