双歧杆菌原生质体的制备及其转化系统的建立

doi:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2012.06.027

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摘要考察了长双歧杆菌WBL001菌体生长状态、酶解浓度、时长、温度以及不同渗透压稳定剂等因素,获得长双歧杆菌WBL001原生质体制备及再生的优化条件:长双歧杆菌以3%接种量活化至MRS培养基,培养至对数中期(OD600∶1),5μg/mL变溶菌素,37℃孵育30 min,以原生质体稳定液SMM为反应缓冲液,原生质体生成率达到81%,其再生率达到48%;在此基础上,通过聚乙二醇PEG融合,将穿梭表达载体pBAX转入双歧杆菌原生质体,成功建立双歧杆菌转化体系。

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关键词: 双歧杆菌原生质体再生变溶菌素转化

Abstract: Six factors involved in the preparation and regeneration of Bifidobacteria longum protoplast were investigated,including state of growing cells,Mutanolysin concentration,enzymolysis time,hydrolysis temperature,and osmotic stabilizers.The optimum conditions were as follows: a log phase(19 h) culture of the recipient strain was grown in MRS medium,Mutanolysin concentration was 5 μg/mL,enzymolysis time was 30 min,SMM was used as reaction buffer.Using these optimum conditions,the protoplast formation rate reached 81%,and the ratio of regeneration was 48% in the optimum regeneration medium.On this basis,a Bifidobacteria transformation system of pBAX with PEG was established.

Key words: Bifidobacteria protoplasts regeneration Mutanolysin transformation

出版日期: 2012-06-25 发布日期: 2012-06-25 期的出版日期: 2012-06-25

引用本文:

Wan Cui-xiang,Zhang Zhao-lin,Wang Bao-gui,等. 双歧杆菌原生质体的制备及其转化系统的建立[J]. 食品与发酵工业, 2012, 38(06): 61-65.
万翠香,章昭琳,王报贵,et al. Prepareation and Transformation of Bifidobacteria Protoplast[J]. Food and Fermentation Industries, 2012, 38(06): 61-65.

链接本文:

http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2012.06.027 或 http://sf1970.cnif.cn/CN/Y2012/V38/I06/61

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