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食品与发酵工业  2014, Vol. 40 Issue (05): 199-205    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2014.05.004
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出血性大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体制备及免疫胶体金试纸条的研制
刘程,刘芳,刘箐,韩舜愈,董庆利,杨标,胡津津,马丽萍
Preparation of monoclonal antibody against EHEC O157∶ H7 and development of a colloidal gold strip for rapid detection of EHEC O157∶ H7
LIU Cheng, LIU Fang, LIU Qing, HAN Shun-yu, DONG Qing-li, YANG Biao, HU Jing-jing, MA Li-ping
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摘要 将骨髓瘤细胞SP2/0与出血性大肠杆菌O157∶H7免疫小鼠得到的脾细胞融合,通过筛选得到3株稳定分泌抗出血性大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体的杂交瘤细胞株D3、E7、B9,D3和B9亚类为IgG1,E7亚类为IgG2a,轻链亚型均为κ。交叉反应结果显示这3株单抗仅结合出血性大肠杆菌O157∶H7,对15株其他细菌无反应,测得胶体金标记单抗最佳pH、最佳结合量分别为D3:pH 7.5~8.0、24μg/mL;B9:pH 7.5、12μg/mL;E7∶pH7.5、18μg/mL,抗体配对选择胶体金结合D3喷涂金标垫、E7以1 mg/mL喷涂NC膜作T线为最优组合,试纸条检测出血性大肠杆菌O157∶H7灵敏度为2.1×106CFU/mL,且仅可检出出血性大肠杆菌O157∶H7,对25株其他细菌均无交叉反应,模拟带菌实验表明,对市售面包、牛奶、果冻各25 g(mL)均添加约200 CFU出血性大肠杆菌O157∶H7,增菌培养8、10、10 h即可检出。研究表明,实验自主制备的抗体性能良好,试纸条特异性、灵敏度达到国外同类产品,可在政府食源性致病菌监管部门、食品企业推广运用。
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刘程
刘芳
刘箐
韩舜愈
董庆利
杨标
胡津津
马丽萍
关键词:  出血性大肠杆菌O157∶H7  单克隆抗体  免疫胶体金  检测    
Abstract: Fusing the Myeloma cells SP2 /0 was fused with spleen from Escherichia coli O157∶ H7 immune mice.Three hybridoma cell lines( D3,E7 and B9) secreting anti EHEC O157∶ H7 monoclonal antibody were obtained after screening,wherein the subtype of D3 and B9 belonged to IgG1,the subtype of E7 belonged to IgG2a,and their light chain subtypes all were κ. The cross reaction results showed that these 3 lines of monoclonal antibody didn't respond to the other 15 bacteria strain except the EHEC O157∶ H7. The best pH for monoclonal antibody labeled with Colloidal gold and their binding capacity were as follows: pH7. 5 ~ 8. 0 and 24 μg /mL for D3,pH7. 5 and 12 μg /mL for B,pH7. 5 and 18 μg /mL for E7. The selected best antibody pairs were the optimal combination of gold pad sprayed with colloidal gold-labelledD3 and NC film coated with 1 mg /mL E7 as T line. The sensitivity of test strip for detection of EHEC O157∶ H7 was 2. 1 × 106CFU /mL. The other 25 bacteria strains had no cross-reactivity. The results from bacteria simulation experiments showed that EHEC O157∶ H7 was detectable in commercially available bread,milk and jelly after 200 CFU EHEC O157∶ H7 was added into 25 g /mL each of them and enrichment cultured for 8 h,10 h and10 h. This study showed that the independent preparated antibody has good performance,and the specificity and sensitivity of test trip were similar as those of foreign products,thus it could be widely used in government food-borne pathogen regulatory authorities and food enterprises.
Key words:  EHEC O157∶ H7    monoclonal antibody    immune colloidal gold    detection
               出版日期:  2014-05-25      发布日期:  2014-05-25      期的出版日期:  2014-05-25
引用本文:    
刘程,刘芳,刘箐,等. 出血性大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体制备及免疫胶体金试纸条的研制[J]. 食品与发酵工业, 2014, 40(05): 199-205.
LIU Cheng,LIU Fang,LIU Qing,et al. Preparation of monoclonal antibody against EHEC O157∶ H7 and development of a colloidal gold strip for rapid detection of EHEC O157∶ H7[J]. Food and Fermentation Industries, 2014, 40(05): 199-205.
链接本文:  
http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2014.05.004  或          http://sf1970.cnif.cn/CN/Y2014/V40/I05/199
[1] 乐莉, 张亚青, 宋尔群, 陶晓奇. 一种荧光DNA生物传感器用于食品中非洲猪瘟病毒的检测[J]. 食品与发酵工业, 2021, 47(9): 268-274.
[2] 李晨晨, 李梦丽, 张涛. 人乳寡糖的研究进展[J]. 食品与发酵工业, 2021, 47(9): 284-292.
[3] 许建东, 张淑娟, 郑小南, 薛建新, 孙海霞. 高光谱技术结合变量选择方法的甘薯冻害检测研究[J]. 食品与发酵工业, 2021, 47(8): 197-203.
[4] 赵海萍, 南丽娟, 雒雪丽, 杨伟霞, 韩雍, 李忠宏. Ni/Co层状氢氧化物模拟氧化物酶可视化检测海产品中Hg2+[J]. 食品与发酵工业, 2021, 47(8): 204-211.
[5] 董晶, 卢鑫, 郭威, 杨倩, 张伟. 等温扩增技术在食源性致病菌检测中的研究进展[J]. 食品与发酵工业, 2021, 47(8): 256-260.
[6] 王嫦嫦, 郑思洁, 战艺芳, 夏定, 白向茹, 王利华, 姚琪, 李婷婷. 结合纳米材料的适配体传感器在重金属检测中的应用研究进展[J]. 食品与发酵工业, 2021, 47(8): 283-289.
[7] 冯林, 陈雪岚. 新型纳米材料与噬菌体展示技术在真菌毒素检测中的应用[J]. 食品与发酵工业, 2021, 47(3): 230-236.
[8] 徐文文, 梁玉林, 王云霞, 刘秀, 尹建军, 周广军, 宋全厚, 丁梦璇, 周鹏飞. 二重环介导等温扩增法快速检测乳粉中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌[J]. 食品与发酵工业, 2021, 47(2): 241-246.
[9] 张明娟, 王娟, 袁磊, 肖昭竞, 龙梅, 李根容. 多重聚合酶链式反应技术在食源性致病菌检测上的应用研究进展[J]. 食品与发酵工业, 2021, 47(2): 305-310.
[10] 叶建秋, 黄丹平, 田建平, 黄丹, 罗惠波, 王鑫, 张力. 高光谱图像技术检测大曲发酵过程中的水分含量[J]. 食品与发酵工业, 2020, 46(9): 250-254.
[11] 朱敏, 孙婷, 白直真, 罗惠波, 田建平, 黄丹. 基于可见光/近红外高光谱技术的窖泥总酸的分布[J]. 食品与发酵工业, 2020, 46(8): 111-117.
[12] 金鹭, 陈传君, 林华, 胡滨, 韩国全, 陈世界, 张婧, 安微, 杨苗. 基于实时荧光PCR对肉制品中羊肉的精确定量[J]. 食品与发酵工业, 2020, 46(8): 246-253.
[13] 董迪, 潘嘹, 卢立新. 包装薄膜对生鲜牛肉可见光谱无损检测的干扰及处理方法研究[J]. 食品与发酵工业, 2020, 46(7): 234-238.
[14] 万晓楠, 畅晓晖, 齐玮, 高欣, 乔彬, 杨向莹, 李小林, 张惠媛, 石嵩, 张捷, 周熙成. 基于近红外免疫层析技术快速检测食源性甲型肝炎病毒[J]. 食品与发酵工业, 2020, 46(7): 213-217.
[15] 陈传君, 金鹭, 林华, 胡滨, 韩国全, 陈世界, 张婧, 安微, 杨苗. 食品中羊肉源性成分微滴数字PCR定量方法的建立[J]. 食品与发酵工业, 2020, 46(6): 229-237.
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