重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体蛋白的柱上复性

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食品与发酵工业 ›› 2008, Vol. 34 ›› Issue (2) : 11.

黄东健,姚忠,刘步云,李环

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On-column Refolding of Inclusion Bodies of N-Acetylornithine Deacetylase

Huang Dongjian,Yao Zhong,Liu Buyun,Li Huan

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摘要

N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶(NAO)具有广泛的底物选择性,可用于多种活性氨基酸的酶法拆分,具有广阔的工业应用前景.文中采用多种洗涤剂对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体进行洗涤去杂,并用DEAESepharose Fast Flow层析柱和三缓冲体系作为复性系统对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙硫基酶包涵体进行复性实验.结果表明,4mol/L尿素与0.5%Triton X-100联合洗涤可以大量去除杂质;三缓冲体系能有效地实现重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体的柱上复性.在流速为0.5 mL/min,尿素梯度为21 mL,尿素终浓度为1.8mol/L,蛋白质上样量为0.99 mg的实验条件下,蛋白回收率和复性酶比活分别达到52%和10.27 U/mg.

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黄东健,姚忠,刘步云,李环. 重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体蛋白的柱上复性[J]. 食品与发酵工业, 2008, 34(2): 11

Huang Dongjian,Yao Zhong,Liu Buyun,Li Huan. On-column Refolding of Inclusion Bodies of N-Acetylornithine Deacetylase[J]. Food and Fermentation Industries, 2008, 34(2): 11