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重组毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白过程的代谢特性 |
王舒,郑志永,詹晓北,史仲平,高敏杰,刘立明,金坚,李华钟 |
江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122 |
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Metabolic Characteristics of Recombinant Pichia pastoris Producing a Fusion Protein-HSA-IL2 |
Wang Shu,Zheng Zhiyong,Zhan Xiaobei,Shi Zhongping,Gao Minjie,Liu Liming,Jin Jian,Li HuaZhong |
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摘要 分析了重组甲醇营养型毕赤酵母在5 L多参数自控发酵罐上生产人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白(HSA-IL-2)的发酵过程.在使用多种在线传感器和离线检测参数的基础上,应用相关性分析的方法将细胞生长的关键酶(乙醇氧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶)酶活和代谢特性相关联.实验结果显示,甲醇诱导后葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶的酶活分别下降了46.1%和66.8%,说明胞内代谢流发生了迁移:三羧酸循环(TCA)和磷酸戊糖途径(HMP)中代谢流通量下降,甲醇完全氧化代谢成为主要代谢流.此外,在不同控制策略下,乙醇氧化酶的酶活和重组蛋白HSA-IL-2表达量也呈现出一定的差异.高溶氧低甲醇控制方式下HSA-IL2的表达量达到27 mg/L,比低溶氧高甲醇条件下的表达量高33.7%.
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出版日期: 2008-08-25
发布日期: 2017-12-01
期的出版日期: 2008-08-25
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基金资助: 国家自然科学基金(60604028) 国家重点基础研究发展计划(973计划)(2007CB714304) 江苏省自然科学基金(BK2006532) |
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