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| 白酒中邻苯二甲酸二乙酯的化学发光酶联免疫分析方法 |
| 黄少文,羿利华,孙远明,雷红涛,柳春红,沈玉栋 |
华南农业大学食品学院,广东广州,510642
华南农业大学食品学院,广东广州,510642;广东省食品质量安全重点实验室,广东广州,510642;农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室,广东广州,510642 |
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| Development of an indirect competitive chmiluminescence enzyme immunoassay for diethyl phthalate in liquor |
| HUANG Shao-wen,YI Lihua,SUN Yuan-ming,LEI Hong-tao,LIU Chun-hong,SHEN Yu-dong |
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摘要 以邻苯二甲酸二乙酯(diethyl phthalate,DEP)为研究目标,以4-氨基邻苯二甲酸二乙酯为半抗原,通过重氮法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DEP的特异性兔多克隆抗体.通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被抗原浓度为50 ng/mL,4℃环境下包被12h;抗体用T液稀释;药物缓冲液选用pH 5.4、0.005 mol/L的PBS缓冲液;酶标二抗用P液稀释,稀释度为1/3000;反应时间是:一抗∶二抗=30 min∶40 min.基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫法检测DEP.该方法对DEP的最低检测限(LOD)为3.09 ng/mL,检测范围(IC20～IC80)为5.93～42.03 ng/mL,半抑制浓度(ICs0)值为16.57 ng/mL,与14种结构类似物及功能类似物交叉反应均远低于0.5％,通过对白酒样品添加回收率的测定,证明了该方法的准确性,适用于白酒中DEP的快速检测.
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出版日期: 2016-08-25
发布日期: 2017-12-01
期的出版日期: 2016-08-25
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基金资助: 农业部农产品质量安全风险评估专项(GJFP201501202)
广东省科技计划项目(2013B020204001) |
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2016, Vol. 42 
