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两阶段温度控制策略以及助剂促进淀粉分支酶的胞外表达 |
王驰,李柱,李才明,顾正彪,洪雁,程力,李兆丰 |
江南大学食品学院,江苏无锡,214122 江南大学食品学院,江苏无锡,214122;江南大学,食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡,214122;江南大学,食品安全与质量控制协同创新中心,江苏无锡,214122 |
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Higher extracellular expression of starch branching enzyme by two-staged temperature strategy and additives |
WANG Chi,LI Zhu,LI Cai-ming,GU Zheng-biao,HONG Yan,CHENG Li,LI Zhao-feng |
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摘要 为了促进重组淀粉分支酶在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WB600)中的胞外表达,对重组淀粉分支酶在摇瓶水平上进行了发酵优化.首先,以胞外酶活力为指标,先后考察了初始培养基、pH、培养温度和培养时间4种因素对胞外表达的影响;然后,通过两阶段温度策略和助剂的添加进一步提高胞外表达水平.结果表明,当发酵培养基为TB、pH为7.5时,25℃培养24 h后胞外酶活力达到19.9 U/mL;同时,菌体生长最适温度和酶分泌的最适温度是不一致的,通过两阶段温度控制策略(即0~12h控制温度30℃,12 h后温度调至25℃),胞外酶活力与单一温度条件下的最高水平(25℃)相比提高了1.4倍,达到了47.1 U/mL;在此基础上,进一步添加0.05%的吐温-80,将胞外酶活进一步提高40%,达到65.8 U/mL.
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出版日期: 2016-08-25
发布日期: 2017-12-01
期的出版日期: 2016-08-25
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基金资助: 高校博士点基金专项课题优先发展领域课题(20130093130001) 中国博士后科学基金-面上资助(2014M560394) 江苏省博士后科研资助计划(1401100C) 江苏省科技支撑计划-农业部分(BE2014305) |
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