一种新ω-3脂肪酸脱饱和酶的克隆表达和活性鉴定

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食品与发酵工业 ›› 2016, Vol. 42 ›› Issue (8) : 31.

梅甜甜,陈海琴,郝光飞,顾震南,陈卫,陈永泉

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Cloning, expression and characterization of a new ω-3 fatty acid desaturase

MEI Tian-tian,CHEN Hai-qin,HAO Guang-fei,GU Zhen-nan,CHEN Wei,CHEN Yong-quan

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摘要

ω-3脂肪酸脱饱和酶催化ω-6多不饱和脂肪酸(PUFAs)转化为ω-3 PUFAs,对ω-3长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFAs)的合成至关重要.为了实现在常温下发酵生产ω-3 LC-PUFAs(主要是二十碳五烯酸,EPA),根据现有常温下偏好催化20C PUFAs的ω-3脂肪酸脱饱和酶序列,从GenBank数据库筛选出与之高度相似的序列并进行生物信息学分析.为了确定序列的生物活性,进一步在酿酒酵母系统中进行重组表达,通过外源添加不同碳链长度的脂肪酸底物,测定重组酿酒酵母转化子在28℃和12℃下对不同脂肪酸的转化率.结果显示,新筛选序列编码的蛋白oAiFADS17既能催化18C PUFAs,又能催化20C PUFAs,尤其偏好催化二十碳四烯酸(AA)转化为EPA.oAiFADS17蛋白在28℃下对各种底物的转化率均高于12℃下的转化率,其中对AA的转化率达到46.3％.该研究成功测定了oAiFADS17蛋白对不同脂肪酸底物的转化率,得到了一种新的常温偏好催化20CPUFAs的ω-3脂肪酸脱饱和酶,为构建高产EPA的基因工程菌株及EPA的工业化生产奠定了理论基础.

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梅甜甜,陈海琴,郝光飞,顾震南,陈卫,陈永泉. 一种新ω-3脂肪酸脱饱和酶的克隆表达和活性鉴定[J]. 食品与发酵工业, 2016, 42(8): 31

MEI Tian-tian,CHEN Hai-qin,HAO Guang-fei,GU Zhen-nan,CHEN Wei,CHEN Yong-quan. Cloning, expression and characterization of a new ω-3 fatty acid desaturase[J]. Food and Fermentation Industries, 2016, 42(8): 31