Please wait a minute...
 
 
食品与发酵工业  2016, Vol. 42 Issue (9): 1-    
  本期目录 | 过刊浏览 | 高级检索 |
高山被孢霉中Δ6脱饱和酶关键位点及其对活性的影响
史海粟,陈海琴,顾震南,张灏,陈永泉,陈卫
江南大学食品学院,江苏无锡,214122
Key sites of Δ6 desaturase from Mortierella alpina and its effect on catalytic activities
SHI Hai-su,CHEN Hai-qin,GU Zhen-nan,ZHANG Hao,CHEN Yong-quan,CHEN Wei
下载:  PDF (3162KB) 
输出:  BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 高山被孢霉中Δ6脱饱和酶(MaFADS6)是决定ω3/ω6多不饱和脂肪酸代谢流的关键酶.利用定点突变技术研究MaFADS6-I一级结构与功能的关系,为高山被孢霉多不饱和脂肪酸的合成提供了理论依据.利用非链取代式质粒扩增技术对已构建质粒pYES2/NT C-MaFADS6-I内的表达单元(即MaFADS6-I)中细胞色素b5区(HPGG)下游的位点进行定点突变,将所有突变体分别转化酿酒酵母进行诱导表达,进一步通过在培养基中添加Δ6脱饱和酶的底物来考察重组菌对各底物的催化作用.实验结果表明,所有突变体催化α-亚麻酸(ALA)的活性没有改变;K61和D68两个位点对催化亚油酸(LA)起关键作用,其对应的4个突变体对LA的转化率分别为(6.2±0.5)%(K61T)、(0.3±0.0)% (K61F)、(8.2±0.7)% (D68N)和(6.6±0.8)%(D68L),相比原始转化率各降低50%以上;G63和T69两个位点对LA的催化无直接影响,但G63T突变体由于突变位点极性改变,其对LA的转化率为(8.5±0.9)%,比原始转化率降低了49.9%;而V66位点的突变体对LA的转化率分别为(22.3±2.6)% (V66T)和(20.7±2.5)% (V66A),比原始转化率分别降低了36.1%和37.8%.确定了MaFADS6-I氨基酸序列中K61和D68两个关键氨基酸位点经突变后均会使其酶活明显降低,这为研究MaFADS6-I一级结构与功能的关系提供了理论依据.
服务
把本文推荐给朋友
加入引用管理器
E-mail Alert
RSS
作者相关文章
               出版日期:  2016-09-25      发布日期:  2017-12-01      期的出版日期:  2016-09-25
基金资助: 国家自然科学基金(21276108)
引用本文:    

链接本文:  
http://sf1970.cnif.cn/CN/  或          http://sf1970.cnif.cn/CN/Y2016/V42/I9/1
No related articles found!
No Suggested Reading articles found!
Viewed
Full text


Abstract

Cited

  Shared   
  Discussed   
版权所有 © 《食品与发酵工业》编辑部
地址:北京朝阳区酒仙桥中路24号院6号楼111室
本系统由北京玛格泰克科技发展有限公司设计开发  技术支持:support@magtech.com.cn