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植物乳杆菌的DPO引物实时荧光PCR检测方法 |
孙凯,魏霜,刘玉莉,许如苏,刘中勇,鄞杰平,袁俊杰,吴希阳 |
暨南大学理工学院,食品科学与工程系,广东广州,510632 汕头出入境检验检疫局,广东汕头,515041 湛江出入境检验检疫局,广东湛江,524000 |
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Real-time PCR for the detection of Lactobacillus plantarum based on dual priming oligonucleotide system |
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摘要 根据已报道的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的23S rRNA基因保守序列,设计用于检测植物乳杆菌的特异性DPO(dual priming oligonucleotide)引物,结合SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR技术,建立植物乳杆菌的DPO引物实时荧光PCR检测方法,对其特异性和灵敏度进行了评价,并将建立的检测方法用于实际样品的检测中.结果显示,该方法对2株植物乳杆菌能得到阳性扩增,其余11株乳酸菌及阴性对照没有扩增曲线,灵敏度高达0.001 ng/μL,而且在退火温度为50 ~ 60℃范围内不影响其特异性,表明该方法对退火温度不敏感;用微生物菌制剂和酸奶共13种益生菌产品进行了验证,检出情况与产品标识一致.因此,该研究建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR能够快速、准确、高效地检测微生物菌制剂及其他益生菌产品中的植物乳杆菌.
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出版日期: 2016-09-25
发布日期: 2017-12-01
期的出版日期: 2016-09-25
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基金资助: 国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2015IK078) |
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