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食品与发酵工业  2018, Vol. 44 Issue (1): 1-    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015351
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谷氨酰胺转氨酶热稳定剂优化
任立均1,2,刘龙1,2 ,刘松1,2,堵国成1,2,陈坚1,2
1(江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡,21412 )2(江南大学 生物工程学院,江苏 无锡,21412 )
Optimization of heat stabilizer of transglutaminase
REN Li-jun, LIU Long*, LIU Song, DU Guo-cheng, CHEN Jian
1 (Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, China) 2(School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China)
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摘要 

谷氨酰胺转氨酶(Transglutaminase,TGase)能够催化蛋白质分子发生交联,被广泛应用于食品、医药和纺织等领域。为提高其热稳定性,研究了糖、盐及醇类等稳定剂对 TGase在 5 ℃下的半衰期[t1/2(5 ℃ )]的影响。结果表明,山梨醇、小麦蛋白、NaCl和葡萄糖能延长 TGase的 t1/2(5 ℃ )。在此基础上进行正交实验,获得最佳的稳定剂配方:山梨醇 50g/L、小麦蛋白 50g/L、NaCl50g/L、葡萄糖 50g/L。在该复合稳定剂保护下,TGase的 t1/2(5 ℃ )和最适反应温度较对照(无稳定剂)分别提高 5973倍和 10℃ ;室温(25℃ )储存 80d的残余酶活率为 7384% ,较对照提高 6279% 。此研究结果将促进 TGase的生产改进和应用拓展。

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关键词:  谷氨酰胺转氨酶(Transglutaminase  TGase)  热稳定性  正交试验  稳定剂  半衰期    
Abstract: Transglutaminase (EC 2.3.2.13, TGase) can catalyze the cross-linking of protein molecules, and it has been widely used in the fields of food, biology, medicine, textile and so on. In order to improve the thermal stability, the effects of carbohydrates, salts and alcohols on the half-life of TGase at 55oC ((t1/2(55oC)) were studied. The results showed that the addition of sorbitol, wheat protein, NaCl and glucose could effectively prolong the half-life of TGase. On this basis, orthogonal experiments were carried out to obtain the best compound stabilizer: 50 g/L sorbitol, 50 g/L wheat protein, 50 g/L NaCl, and 50 g/L glucose. Under the protection of the compound stabilizer, thet1/2(55oC) value and the optimum reaction temperature of TGase were increased by 59.73-fold and 10oC respectively compared with the control (no stabilizer), and the residual enzyme activity rate after storage at room temperature (25oC) for 80 days was 73.84%, 62.79% higher than the control. The results of this study will facilitate the improvement of TGase production and application development.


Key words:  transglutaminase (TGase)    thermal stability    orthogonal array design    stabilizers    half-life
               出版日期:  2018-01-25      发布日期:  2018-02-02      期的出版日期:  2018-01-25
基金资助: 国家863计划项目(2015AA021003);国家自然科学基金(31401638)
通讯作者:  刘 龙,博士,教授,微生物系统代谢工程及工业酶的分子定向修饰。E-mail:longliu@jiangnan.edu.cn    
作者简介:  任立均,硕士在读,发酵工程。E-mail:13260937837@163.com
引用本文:    

链接本文:  
http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015351  或          http://sf1970.cnif.cn/CN/Y2018/V44/I1/1
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