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| 猪溶菌酶在大肠杆菌中的表达及其复性 |
| 朱德伟,蔡国林,陆健 |
| 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,生物工程学院,江苏无锡,214122 |
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| The expression of Sus scrofa lysozyme in E.coli and its refolding |
| ZHU De-wei,CAI Guo-lin,LU Jian |
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摘要 作为C型溶菌酶的一种,猪溶菌酶(Sus scrofa lysozyme,SSL)是猪体内抵抗外源性疾病的一道重要屏障.鉴于猪在畜牧行业中的重要地位,尤其是在饲用抗生素的使用严重受限的今天,SSL的生产显得尤为迫切.化学合成得到了SSL的编码基因,通过BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切之后与载体pET-28a(+)连接,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.在25℃、200 r/min条件下,利用0.1 mmol/L的IPTG诱导8h,离心发酵液获得菌体.对其进行超声破碎获得重组蛋白包涵体,然后对包涵体进行复性,最终获得了具有生物活性的目的蛋白,并对其酶学性质以及抗菌活性进行了研究.超声破碎后获得了181.05 mg/L的重组蛋白包涵体,对包涵体进行复性后,比酶活力可达8 032.78 U/mg,其最适温度为35℃,最适pH为6.0,与其理论值基本一致,而其抗菌活性与标准品溶菌酶的作用效果也比较类似,为其规模化生产与进一步应用奠定了理论基础.
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出版日期: 2016-10-25
发布日期: 2017-12-01
期的出版日期: 2016-10-25
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基金资助: 973项目(2013CB733602)
中央高校基本科研业务费专项资金资助(JUSRP51302A)
江苏高校优势学科建设工程资助项目 |
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2016, Vol. 42 
