研究报告

解淀粉芽孢杆菌的强启动子的克隆与鉴定

  • 刘晓川 ,
  • 蔡旭新 ,
  • 陈华强
展开
  • (广东肇庆星湖生物科技股份有限公司,广东 肇庆,526040)
理学学士,工程师(本文通讯作者,E-mail:xcls2000@sohu.com)。

收稿日期: 2018-05-24

  网络出版日期: 2019-02-01

Clone and identification of a strong promoter from Bacillus amyloliquefaciens

  • LIU Xiaochuan ,
  • CAI Xuxin ,
  • CHEN Huaqiang
Expand
  • (Star Lake Bioscience Co., Inc. Zhaoqing 526040, China)

Received date: 2018-05-24

  Online published: 2019-02-01

摘要

利用启动子探针质粒,从解淀粉芽孢杆菌XH7基因组中分离得到1个强度较高的启动子P28,该启动子在大肠杆菌中表达的β-半乳糖苷酶酶活为2 350 Miller U/mL,在枯草芽孢杆菌中的酶活为3 340 Miller U/mL。启动子的序列分析表明该启动子由σK因子识别,由2个启动子串联而成,分别为编码羧基末端加工蛋白酶的基因(ctpA)和编码转醛酶的基因(tal)启动子,为芽孢杆菌启动子库提供了一个新的选择。

本文引用格式

刘晓川 , 蔡旭新 , 陈华强 . 解淀粉芽孢杆菌的强启动子的克隆与鉴定[J]. 食品与发酵工业, 2019 , 45(1) : 41 -43 . DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.017857

Abstract

Using a promoter probe plasmid, promoter P28 was isolated from Bacillus amyloliquefaciens XH7, which exhibited β-Gal activity in Escherichia coli (2 350 Miller U/mL) and Bacillus subtilis (3 340 Miller U/mL). Sequence analysis showed that promoter P28 contained PctpA (a ctpA gene encoding carboxy-terminal processing protease) and Ptal (a tal gene encoding translaldolase) connection in series, and it was recognized by sigma factor σK. Thus, this study provided a new strong promoter to the promoter library of Bacillus species.

参考文献

[1] SCHUMANN W. Production of recombinant proteins in Bacillus subtilis [J]. Advances in Applied Microbiology,2007,62: 137-189.
[2] YANG Ming-ming, ZHANG Wei-wei, JI Sheng-yue, et al. Generation of an artificial double promoter for protein expression in Bacillus subtilis through a promoter trap system [J]. PLoS One,2013,8:e56321.
[3] SCHALLMEY M, SINGH A, WARD OP. Developments in the use of Bacillus species for industrial production [J]. Canadian Journal of Microbiology,2004,50(1): 1-17.
[4] 车晓曦,李校堃. 解淀粉芽孢杆菌(Bacilus amyloliquefaciens)的研究进展[J]. 北京农业,2010,1: 7-10.
[5] ZAKATAEVA NP, NIKITINA OV, GRONSKIY SV, et al. A simple method to introduce marker-free genetic modifications into the chromosome of naturally nontransformable Bacillus amyloliquefaciens strains [J]. Applied Microbiology and Biotechnology,2010,85:1 201-1 209.
[6] 李晓静. 枯草芽孢杆菌中的σ因子[J]. 安徽农学通报,2010,16(20):49-52.
[7] 徐佳,皮莉,张玉,等. 基于Egfp的启动子高通量筛选方法的研究[J]. 现代食品科技, 2018,34(1):1-7.
[8] 张爱玲,张丽,杨明明. 等. 鸟枪法筛选枯草芽孢杆菌基因强启动子及对黄牛GHRL基因的表达[J]. 华南农业大学学报,2011,32(3):92-96.
[9] 陈坤,袁飞燕,柴昊男,等. 一种高效表达碱性蛋白酶的新型启动子的筛选及研究[J]. 生物技术通报, 2018, 34(3): 1-6.
[10] 彭清忠,陈军,陈玲,等. 短小芽孢杆菌启动子筛选载体的构建[J]. 生命科学研究,2010,14(2):117-121.
[11] 张婷婷,马磊. 蜡样芽孢杆菌启动子片段克隆及转录活性分析[J]. 江苏农业科学,2014,42(4):25-27.
文章导航

/