龋齿是最常见的口腔疾病之一,主要由变异链球菌和白色念珠菌引起,研究证明抑制这2种致龋菌可以有效预防龋齿发生。为了评估由鼠李糖乳酪杆菌CCFM1070和唾液联合乳杆菌CCFM1215组成的复合益生菌对龋齿的改善作用,该研究通过建立大鼠龋齿模型,检测了益生菌干预后大鼠口腔中致龋菌数量变化、大鼠牙釉质体积大小及龋齿评分。结果发现,复合益生菌组可以显著降低大鼠口腔中变异链球菌的数量,干预4周后,由(5.55±0.06) lg CFU/mL降低到(4.03±0.14) lg CFU/mL(P<0.05),同时也显著抑制了白色念珠菌的数量(4.62±0.07)lg CFU/mL降低至(3.42±0.07) lg CFU/mL(P<0.05)。复合益生菌组大鼠的牙釉质体积由(1.75±0.17) mm3显著增加至(2.61±0.09) mm3(P<0.05),牙齿光滑面釉质龋(E级)、牙本质浅龋(Ds级)、牙本质中层龋(Dm级)和牙本质深层龋(Dx级)龋齿评分均显著降低,此外牙齿窝沟面Dm级龋齿评分由(6.67±1.33)显著降低至(0.67±0.42)(P<0.01)。以上结果说明本复合益生菌可以有效改善龋齿。
两歧双歧杆菌作为重要益生菌,其工业化培养过程中存在氮源利用率低、生长密度低等问题。前期研究发现,两歧双歧杆菌可利用含脯氨酸的肽。该研究旨在根据两歧双歧杆菌的氮源利用特征靶向制备脯氨酸肽,以提升氮源利用效率和生长水平。研究优选5种富脯氨酸蛋白和5种蛋白酶制备短肽,结合菌株培养从中筛选出了2种高含脯氨酸且对生长有益的底物蛋白(酪蛋白、谷蛋白)。结合菌株氮源利用特性与肽酶特征制定多步酶解策略,利用计算机工具预测了酶解肽,并使用分子对接模拟肽段与肽转运的关键蛋白寡肽结合蛋白OppA(oligopeptide binding protein A,OppA)的结合,发现77.5%以上的肽都能与OppA有效结合。经酶解制备得到了6种脯氨酸肽,分子质量为180~2 000 Da的肽占到72.49%以上(180~500 Da的短肽>50%),且脯氨酸大多以肽的形式存在(极少量游离)。将制备的脯氨酸肽与1种乳清蛋白肽都用作培养,发现乳清蛋白肽WA(whey protein peptides hydrolyzed by alkaline protease, WA)与酪蛋白肽CAF(casein peptides hydrolyzed by alkaline protease and flavourzyme, CAF)按质量比2∶1复配,添加量8 g/L时活菌数达到(2.04±0.1)×109 CFU/mL,单位氮源产生(1.38±0.18)×1012 CFU的活菌,相较于传统MRS培养基分别提升35%和198.5%。该研究为两歧双歧杆菌的高效培养及工业化应用提供了创新策略。
为筛选获得新的咸味肽,以酵母抽提物为原料,采用中性蛋白酶和风味酶两步酶解法制备咸味肽,进一步利用超滤、凝胶过滤色谱和液相色谱-质谱联用技术进行分离纯化和鉴定,通过构建跨膜通道样4(transmembrane channel like 4,TMC4)蛋白模型进行分子对接和生物信息学方法筛选得到了酵母源咸味肽。结果表明,在酶解、超滤和凝胶过滤后制备的咸味值较高组分中,鉴定得到751条肽段序列。根据氨基酸类型、肽链长度和序列,选择其中的59条多肽与TMC4蛋白模型进行了分子对接。根据对接结合能的大小和生物信息学分析,最终选出5种咸味肽LPWGER、GPEWSR、AGPWSR、IPWGK和REYY,均具有无毒、无致敏性和良好的稳定性。该研究为酵母咸味肽开发提供了理论基础,为实现减盐食品生产提供了新型肽原料。
该研究以小米为研究对象,通过优化原料熟化工艺、筛选发酵菌种、优化发酵工艺,系统研究了小米发酵饮料的制备工艺、营养成分及风味物质。结果表明挤压膨化处理过的小米粉替代碳源的量为200%时,鼠李糖乳酪杆菌的增殖量为(9.48±0.10) lg CFU/mL,鼠李糖乳酪杆菌在这种熟化后的小米粉替代碳源的培养基中增值效果最好。选择小米粉的熟化方式为挤压膨化,发酵菌种为鼠李糖乳酪杆菌。通过单因素试验及正交试验,以蛋白含量为检测指标,确定了最佳发酵工艺,当料液比为1∶10.5(g∶mL)、接种量为3.0%、发酵时间为9.8 h,得到发酵饮料的蛋白质量浓度为(6.82±0.13)mg/mL,该条件下小米发酵饮料蛋白含量最高。小米饮料发酵后相比于发酵前总游离氨基酸含量增加了12.1%,必需游离氨基酸含量增加了11.4%,发酵后的小米饮料中必需游离氨基酸占游离氨基酸总量的33.5%。小米发酵饮料发酵前后共检测到165种挥发性风味物质,发酵后的小米饮料风味中己酸占比最高,为27.8%;醛类物质中己醛、2,4-癸二烯醛和2-辛烯醛占比最高,含量分别为4.37%、5.69%和2.18%;醇类物质中1-己醇和1-戊醇占比最高,分别为7.85%和1.93%。己酸的特征风味为柔和酸味;戊酸的特征风味为酿香、奶酪香和果香;己醛具有香草味;醇类物质可产生的特征风味是脂肪香和清木香,这些物质是发酵饮料风味的主要来源。该研究为小米发酵饮料的开发应用提供理论依据,同时为谷物发酵饮料的生产提供技术参考。