邓永蓉, 韩丽娟, 岳庆明, 漆莹, 马娜娜, 赵玉欣
为研究黄刺粗多糖(Berberi dasystachya polysaccharides,BDPs)对H2O2诱导的RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用,以黄刺浆果为原料,通过单因素试验和响应面Box-Behnken设计实验优化超声波辅助酶解提取黄刺果实多糖的工艺。采用高效体积排阻色谱、离子色谱、扫描电镜及刚果红实验对BDPs理化性质进行分析,以H2O2诱导RIN-m5F细胞建立氧化应激损伤模型,通过CCK-8法测定细胞存活率,DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量探讨BDPs对氧化损伤细胞的保护作用。结果表明,当加酶量为1.25%(质量分数),酶解时间57 min,酶解温度45 ℃,超声波功率164 W时,黄刺多糖提取得率为(3.478±0.075)%,与预测值3.451%相近。此外,BDPs的重均分子质量为10.2 kDa,主要由岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸以及葡萄糖醛酸组成(摩尔比为1∶42.2∶32.6∶11.8∶4.4∶56.1∶5.1∶1.8)。刚果红实验结果表明,BDPs具有三螺旋结构。细胞实验结果表明,H2O2能够导致RIN-m5F细胞的氧化损伤,与模型组相比,经0.062 5~0.5 mg/mL的BDPs干预后的细胞存活率增加(P<0.05),ROS、MDA水平呈下降趋势。BDPs能够提高细胞SOD、CAT活性,并且呈一定量效关系。综上所述,BDPs在一定剂量范围内可以提高细胞存活率,对H2O2诱导的氧化损伤具有保护作用,研究结果可为黄刺多糖功能研究提供参考。