黄靖佳, 陶秀梅, 孔德明, 陈星奕, 吴敬, 陈晟, 王蕾
环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glucosyltransferase,CGTase)制备环糊精(cyclodextrin,CD)时,部分淀粉底物无法被利用,导致淀粉原料利用率以及生产效率低,为解决上述问题,该研究用Escherichia coli BL21(DE3)克隆表达了一种新型淀粉脱支酶,来源于光滑念珠菌(Candida glabrata)的糖原脱支酶(glycogen debranching enzyme,GDE)CgGDE,当摇瓶发酵温度为25 ℃,诱导剂IPTG终浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为36 h时,CgGDE的酶活力达69.3 U/mL。酶学性质结果表明,CgGDE的最适pH值为6.0,最适温度为35 ℃。利用CgGDE与β-CGTase复配制备β-CD,结果表明,在非溶剂条件下,当马铃薯淀粉质量浓度为50 g/L,温度40 ℃,反应pH值为6.0,CgGDE添加量为750 U/g干淀粉,β-CGTase添加量为7 U/g干淀粉,转化周期24 h时,β-CD转化率为53.1%,比单独使用β-CGTase转化率提高了93.8%,与异淀粉酶β-CGTase联用相比,转化率提高了50.9%,为β-CD在非溶剂条件下的转化奠定了基础。